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自由システイン定量

自由チオール基は、システインの硫黄原子が形成する特別な構造です。自由チオール基は非常に反応性が高く、他のタンパク質と結合してその構造や機能を変化させることができます。また、酸素分子と反応して酸化物を生成し、細胞や組織を損傷させることもあります。自由チオール基の定量は、抗体などのタンパク質系生物製品の重要な検査項目です。例えば、自由チオール基を含む抗体の生物学的機能は、完全な抗体と比べて低下することがあり、時には大きな差異が生じることもあります。したがって、自由チオール基の量を迅速かつ正確に測定することは、製品の初期プロセス開発および後期生産モニタリングにおいて非常に重要です。


自由チオール基定量

チオール基とジスルフィド結合は、活性基団として酵素の触媒作用、補因子の結合、タンパク質の活性構造の維持に関与することが多いです。自由チオール基の含量は、タンパク質の性質や存在形態に大きく関係し、バイオ医薬品の製造過程における品質検査の重要なステップです。


エルマン法は自由チオール基の濃度を測定する一般的な方法で、DTNB試薬が遊離チオール基と反応して、2-ニトロ-5-チオベンゾ酸(TNB)を生成する原理に基づいています。-中性またはアルカリ性pH条件下で水中でイオン化し、TNB2-二価陰イオンを生成します。このTNB2-イオンは黄色を呈し、412nmの可視光吸光度を測定することでTNBの定量が可能です。2-その後、システイン標準品を使用してチオール基を定量する方法や、モル吸光係数に基づいてチオール基を定量する方法で自由チオール基を定量できます。


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バイオテックパーク生物技術(BTP)は、CNAS/ISO9001の二重品質認証システムに基づいて7つの検査プラットフォームを設立しており、その中で自由チオール基含量検査プラットフォームはCNAS認証を受けており、完全な方法学開発と移転能力を有しています。BTPは他にも生物製品の特性解析関連するサービスを提供しています。詳細をクリックしてご確認ください。


バイオテックパーク生物技術生物製品特性解析サービス内容


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技術レポートでは、バイオテックパーク生物技術が詳細な中/英語バイリンガル版の技術レポートを提供します。レポートには以下が含まれます:


1. 実験手順(中英語)

2. 関連する質量分析パラメータ(中英語)

3. 生データ

4. 自由チオール基の定量結果


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