タンパク質相互作用分析
タンパク質相互作用とは、2つ以上のタンパク質分子が結合してタンパク質複合体を形成するプロセスを指します。一般的に、タンパク質は単独で機能を発揮することは難しく、複数のタンパク質分子が協調して細胞の複雑な機能を実現します。したがって、タンパク質相互作用の研究に注力することは、病気の発生と進行を探ることや、特定の病気の予測および治療方法を見つけることに有利です。また、新薬開発の研究において新しいアイデアを提供します。タンパク質相互作用解析の方法は多岐にわたり、百泰派克はタンパク質相互作用解析サービスを提供しています。液体クロマトグラフィーと質量分析（LC-MS/MS）技術に基づいてIP、Co-IPサンプル、およびGST融合タンパク質Pull-downなどの精製サンプル中のタンパク質/タンパク質混合物の質量分析を行います。詳細は以下をご覧ください：
タンパク質相互作用質量分析
免疫沈降法（Co-IP）と質量分析を組み合わせたタンパク質相互作用解析
GST融合タンパク質Pull-down技術と質量分析を組み合わせたタンパク質相互作用解析
SILACと免疫沈降法を組み合わせた質量分析によるタンパク質相互作用解析
1、免疫沈降法（Co-IP）によるタンパク質相互作用解析
免疫沈降法（Co-IP）は、抗原と抗体の特異的な相互作用を利用してタンパク質間の生理的な相互作用を検出する方法です。実験では細胞中のタンパク質の相互作用を最大限に保持するため、非イオン性界面活性剤を用いて細胞を破壊します。細胞を破壊すると、細胞内のタンパク質相互作用が保持され、適切な抗体を加えて細胞内の特異的タンパク質と結合させます。その後、タンパク質A/Gを加えて抗体タンパク質複合体を形成し、遠心分離によって分離し、超natantを除去し、質量分析を用いて沈殿したタンパク質を同定します。これにより、2者間の相互作用が証明されます。安定または強いタンパク質間相互作用の解析にのみ適しています。通常、特定のターゲットタンパク質と他のタンパク質との相互作用を同定するために使用されるか、ターゲットタンパク質と相互作用する未知のタンパク質を探すために使用されます。
百泰派克生物科技は、サンプルタンパク質の抽出、発現および精製の最適化プランを提供し、高品質の餌と獲物タンパク質を保証します。お客様にCo-IPタンパク質相互作用解析サービスを提供し、免疫沈降法（Co-IP）で得られたタンパク質を質量分析します。
百泰派克のタンパク質相互作用解析
• 利点：天然状態で相互作用するタンパク質複合体を分離できる；
• 欠点：感度が低い；低親和性と瞬間的なタンパク質相互作用の解析には適していない。
2、GST融合タンパク質pull-down沈降技術によるタンパク質相互作用解析
GST融合タンパク質pull-down沈降技術は、GSTタグを持つベクターを目的タンパク質Aに組み込むことによって、グルタチオンを覆ったビーズが目的融合タンパク質と結合します。細胞溶解液を加えると、相互作用するタンパク質が融合タンパク質に吸着され、過剰のグルタチオンを加えて洗脱し、最終的にMS技術で分析します。この方法は、体外での強いまたは安定したタンパク質間相互作用の研究に主に使用されます。2つの既知の興味あるタンパク質の間に存在する可能性のある直接的な相互作用を同定することができ、ターゲットタンパク質と相互作用する可能性のある未知のタンパク質を探すことができます。
技術依存型の研究技術サービス企業として、百泰派克生物科技はタンパク質相互作用解析サービスおよび質量分析に基づく相互作用タンパク質質量同定分析において多年の経験を有しています。百泰派克は、GST pull-downタンパク質相互作用解析サービスおよびPull-downターゲットタンパク質質量同定サービスを提供します。厳格な品質管理と短期間の検査周期を特色とし、百泰派克はお客様にプロジェクトの各ステップをカバーするカスタマイズ可能なワンストップサービスを提供します。
• 利点：細胞内の他の状況の干渉を排除できる；タンパク質間の相互作用を直接検出できる；方法が簡単で操作が便利。
• 欠点：細胞外で行われるため、細胞内のタンパク質相互作用を正確に反映することができない。
3、SILACと免疫沈降質量分析を組み合わせたタンパク質相互作用解析
SILAC方法を使用して実験群と対照群の細胞をそれぞれラベル付けし、Co-IP実験を行います。抗原と抗体の特異的な反応に依存して免疫複合体を分離し、LC-MS/MSを通じて免疫複合体中のタンパク質を定性的/定量的に分析します。実験群と対照群で特定のタンパク質の量が統計的に有意な差異を示す場合、そのタンパク質が研究対象のタンパク質と相互作用することを判定します。SILAC技術とCo-IP-MS技術を組み合わせることで、特定の状況下でのタンパク質相互作用ネットワークを高スループットで定量分析することができます。
百泰派克生物科技は、Thermo FisherのQ Exactive HF質量分析プラットフォーム、Orbitrap Fusion質量分析プラットフォーム、Orbitrap Fusion Lumos質量分析プラットフォームとNano-LCを組み合わせて、SILACと免疫沈降質量分析を組み合わせたタンパク質相互作用解析サービス技術パッケージ（SILAC-based CoIP-MS）を提供します。お客様は実験の目的を伝え、細胞を送るだけで、プロジェクトのすべての手続きをお任せいただけます。細胞培養、細胞標識、タンパク質抽出、抗体IP、効率検査、タンパク質酵素切断、ペプチド分離、質量分析、質量分析の生データ分析、生物情報学分析を含みます。
関連サービス
クロスリンク法によるタンパク質相互作用解析
Far-Western Blot解析
ラベル転移法によるタンパク質相互作用解析
Pull-downターゲットタンパク質質量同定
PROTAC薬物のオフターゲット解析
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