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N-グリコシル化部位分析

N-糖鎖化は、さまざまな生理および病理過程に関与するタンパク質の翻訳後修飾です。糖鎖化修飾部位の可変性は細胞活動の重要な指標であり、血清タンパク質糖鎖化付着部位の減少が先天性糖鎖化疾患(CDGs)の重症度と関連していることが証明されています。したがって、タンパク質糖鎖化が人体の健康に与える影響を十分に理解するためには、部位占有率を正確に確認することが重要です。

糖鎖化付着部位を特定するために、通常は重水中でタンパク質N-グリカナーゼF(PNGase F)を使用してタンパク質から多糖を分離します。この過程で、元の糖鎖化アスパラギンは脱アミド化を経てアスパラギン酸となり、O18修飾が増加します。O18が導入されると分子質量が変化するため、糖鎖化部位はアスパラギン酸を含むペプチドと非糖鎖化アスパラギンを含むペプチドを比較することで検出できます。糖タンパク質中の可変N-糖鎖化部位の一般的な分析戦略には、タンパク質のPNGaseF酵素消化、グリカンの放出、液相クロマトグラフィーによる糖ペプチドの分離、質量分析による検出が含まれます。
基于LC-MS的N-糖基化位点附着一般分析流程

LC-MSに基づくN-糖鎖化部位付着の一般的な分析フロー


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日英プロジェクト報告書

技術報告書では、バイオテックパークが詳細な日英のバイリンガル技術報告書を提供します。報告書には以下が含まれます:

1. 実験手順(日英)
2. 関連する質量分析パラメーター(日英)
3. 質量分析画像
4. 生データ
5. 鑑定された糖鎖化部位の詳細情報

N-糖鎖化部位分析ワンストップサービス

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