HPLC質量ペプチドマップ分析

HPLC質量ペプチドマップ分析は、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）の分離能力と質量分析（MS）の定性・定量能力を組み合わせ、高速液体クロマトグラフィーと高分解能質量分析（LC-MS/MS）プラットフォームを用いて検出を行います。そのHPLC技術を用いてペプチドを効果的に分離し、MSを利用して質量と電荷を測定、各クロマトグラフィーピークに対応するペプチドを特定し、ペプチドマップに割り当て、特徴的な指紋を持つペプチドマップを形成します。HPLC質量ペプチドマップ分析は、試料の包括的な情報を提供できます。

バイタイパークバイオテクノロジーBTPは、質量ペプチドマップ分析の原理に基づき、高速液体クロマトグラフィーと高分解能質量分析装置を組み合わせたHPLC質量ペプチドマップ分析プラットフォームを構築しました。バイタイパークバイオテクノロジーCNAS/ISO9001のデュアル品質システム認証を取得し、ワンストップのHPLC品質ペプチドマップ分析サービスを提供しています。無料でお問い合わせいただき、詳細をご確認ください！

実験機器

• 液体クロマトグラフィー：UltiMate3000

• 高分解能質量分析装置：AB SCIEX 5600+

技術応用

• ミラーマップを利用してバッチ間の安定性または各バッチのサンプルと標準品との違いを判断し、一致しない位置を正確に特定します。

• さらに、タンパク質バリアントの定性分析、ジスルフィド結合の位置特定、糖鎖化部位の分析、タンパク質修飾部位の特定などに利用できます。

ケーススタディ

プロテアーゼで消化したサンプルは高速液体クロマトグラフィーで分離され、質量分析検出器がデータを収集し、ペプチドマップ結果を得ました。マップは次の通りです。

試験品の総イオン流クロマトグラム

収集した質量分析の生データをソフトウェアで検索・分析し、ペプチド情報とクロマトグラフィーピークの対応関係を次の表に示します。

NO	RT (min)	Identification	Peptide Sequence	Score	M/Z	z	Delta (ppm)	Mono Mass Exp.	Theoretic al Mass	MS Area
1	7.61	90-98	QIAPGQTGK	423.1	899.4940	1	-0.56	898.4867	898.4872	2.60E+09
2	9.49	139-147	KSNLKPFER	611.1	559.8209	2	2.06	1117.6267	1117.624	3.90E+09
3	11.06	60-67	CYGVSPTK	516.7	911.428	1	-1.21	910.4208	910.4219	1.70E+10
4	12.60	140-147	SNLKPFER	505.4	495.773	2	2.22	989.5316	989.5294	2.10E+10
5	13.87	99-105	IADYNYK	360.7	886.4288	1	-1.92	885.4215	885.4232	3.40E+10
6	15.69	1-9	VQPTESIVR	384.4	1028.5748	1	1.36	1027.5676	1027.566	2.30E+10
7	22.25	1-9	VQPTESIVR	362.0	535.7957	2	0.00	1069.5768	1069.5768	1.70E+10
8	25.19	126-135	VGGNYNYLYR	464.7	609.8023	2	5.91	1217.5901	1217.5829	1.80E+10
9	30.21	28-36	FASVYAWNR	533.4	557.2795	2	3.78	1112.5445	1112.5403	1.80E+10
10	32.93	219-226	CVNFNFNG	316.3	486.2056	2	0.00	970.3967	970.3967	4.10E+09
11	33.89	219-226	CVNFNFNG	407.2	971.4058	1	1.85	970.3985	970.3967	3.40E+09
12	43.22	68-84	LNDLCFTNVYAD SFVIR	446.2	683.0033	3	0.00	2045.9881	2045.988	1.50E+09
13	43.60	191-209	VVVLSFELLHAD ATVCGPK	798.5	679.7116	3	0.00	2036.1129	2036.1129	3.80E+09
14	44.89	106-126	LPDDFTGCVIAW NSNNLDSK	497.8	1133.5317	2	5.17	2265.0489	2265.037	4.50E+09

試験品のペプチド情報とクロマトグラフィーピークの対応関係表

シーケンスカバレッジマップ

中/英語プロジェクトレポート

技術レポートでは、バイタイパークが詳細な中英二言語版の技術レポートを提供し、レポートには以下が含まれます。

1. 実験手順（中英語）
2. 関連する質量分析パラメータ（中英語）
3. HPLC質量ペプチドマップ分析詳細情報
4. 質量分析画像
5. 生データ