タンパク質分子量測定

分子量は有機化合物の基本的な理化特性のパラメーターです。分子量が正確かどうかは、測定した有機化合物や生物高分子の構造が正しいかどうかを示すことが多いです。分子量はペプチドやタンパク質の識別においても重要なパラメーターであり、バイオテクノロジー製品の承認においても重要なデータの一つです。

マトリックス支援レーザー脱着イオン化飛行時間質量分析（MALDI-TOF-MS）は、近年開発された新しいタイプのソフトイオン化生物質量分析法であり、サンプル消費量が少なく、感度が高く、測定速度が速く、高スループットを容易に実現でき、大規模なタンパク質の識別および生物高分子の分子量測定などの特徴を持ち、タンパク質研究において強力な分析手段を提供します。簡便で直感的であり、大分子の混合物を直接測定可能で、基本的にフラグメントピークが発生しないというMALDI-TOF-MSの利点により、この技術は生物高分子の分子量測定に広く利用されています。MALDI-TOF-MS装置は主に2つの部分で構成されています：マトリックス支援レーザー脱着イオン化イオン源（MALDI）と飛行時間質量分析器（TOF）。MALDIの原理は、レーザーでサンプルとマトリックスが形成する共結晶薄膜を照射し、マトリックスがレーザーからエネルギーを吸収して生物分子に伝達し、生物分子をイオン化させるプロセスです。これはソフトイオン化技術であり、混合物および生物高分子の測定に適しています。TOFの原理は、イオンが電場の作用で加速されて飛行管を飛行し、検出器に到達する飛行時間の違いに基づいて、イオンの質量電荷比（M/Z）とイオンの飛行時間が比例することでイオンを検出し、イオンの検出を実現します。MALDI-TOFの精度は0.1％から0.01％に達し、現在の一般的に使用されているSDS電気泳動や高効率ゲルクロマトグラフィー技術よりもはるかに高く、現在測定可能な生物高分子の分子量範囲は700〜600,000Daです。

Baitepike社は、Bruker社のultrafleXtreme™ MALDI TOF/TOF質量分析システムを使用し、多くの研究者に生物分子の分子量測定サービスを提供し、ターゲットタンパクまたはペプチドの分子量を分析し、タンパク質二量体を検出し、サンプルの純度を大まかに評価します。

サンプル要件

1. サンプルの必要量は約10-50ugです。
2. サンプルの純度は>90％です。
3. サンプルの準備過程で界面活性剤（例：SDS、Triton-Xなど）の使用を避けるようにし、塩濃度（例：Trisなど）もできるだけ低くします。
4. サンプルの準備過程で界面活性剤や高塩濃度を使用する必要がある場合、受け取ったサンプルに対してまず関連する実験を行い、これらの化合物を除去してから、後続の分子量測定を行います。

サンプル輸送
1. サンプルは凍結乾燥して輸送することをお勧めします。凍結乾燥したサンプル中のタンパク質は非常に安定しています。
2. 液体サンプルの輸送にはドライアイスを使用することをお勧めします。短距離の輸送には氷袋も可能です。

注意
ゲル粒子サンプルやPVDF膜に転写されたサンプルは、分子量測定実験には適していません。

研究ケース

MALDI-TOFの応用過程において、サンプルの分子量を検出するだけでなく、サンプル自身の純度に関する情報も提供できます。以下の図に示すように、サンプルは理論分子量1046.6Daの範囲で明確な信号ピークを示し、サンプルの純度は良好です。

分子量測定研究ケース

中/英語プロジェクト報告

技術報告において、Baitepikeは詳細な中英二言語の技術報告を提供します。報告には以下が含まれます：

1. 実験手順（中英）
2. 関連する質量分析パラメータ（中英）
3. 質量分析画像
4. 元データ
5. タンパク質分子量と純度分析結果