IPサンプルは室温でほぼ1日放置（すでに沸騰済み）されましたが、取り出すのを忘れ、夜間に機器がオフになっています。このまま使用できますか？

以下の点に重点を置いて検討する必要があります：

一、タンパク質の完全性

1、すでに沸騰させた（通常はSDSや還元剤を含む）サンプルは、大部分の天然のコンフォメーションと酵素活性が失われており、理論的には顕著な劣化は発生しません。

2、しかし、室温で長時間放置すると、一部の沈殿しやすいまたは溶解しにくい成分が凝集する可能性があり、特に高濃度のSDSまたは尿素を含む場合、温度が低下すると析出しやすくなります。

 

二、微生物汚染と緩衝系

1、緩衝液に抑菌剤が含まれていない場合（高濃度のSDSを除く）、室温で長時間放置すると細菌が繁殖し、サンプルが濁ったり劣化したりする可能性があります。

2、Trisなどの緩衝系は室温でpHがわずかに変化することがありますが、通常は大きな影響はありません。

 

三、後続の用途によって使用可能かどうかが決まります

1、SDS-PAGE/Western blotに使用する場合：基本的に使用可能ですが、沈殿物がある場合は遠心分離して除去し、必要に応じて再度沸騰させることをお勧めします。

2、酵素学的実験や質量分析（特に定量質量分析）を行う場合：直接使用することはお勧めしません。汚染や修飾（酸化、脱アミド化）のリスクが高く、データの信頼性に影響を与える可能性があります。

 

処理の提案：

• まず遠心分離して明らかな沈殿や濁りがあるかどうかを確認する；

• WBのみの場合、直接使用するか、再度沸騰させてから使用する；

• 質量分析や機能実験を行う場合、再度準備することをお勧めします。または、影響を評価するために対照を作成することをお勧めします。

 

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