2D Blue Native/SDS-PAGE複合体分析サービス

生体膜では、多くのタンパク質が複合体として構成されています。百泰派克バイオテクノロジーは、2D Blue Native/SDS-PAGEを利用して、これらのタンパク質複合体のサブユニットを全体的に分析することができます。2D BN/SDS-PAGE分析では、サンプルはブルーネイティブポリアクリルアミドゲル電気泳動によって一方向に分離されます。SDS-PAGEその後、SDS-PAGEによって二方向に分離されます。

2D Blue Native SDS-PAGE複合体分析サービス

タンパク質複合体は、時間および空間のすべての複雑な側面で細胞および細胞小器官の機能を組織化および維持することができ、細胞の発育と分裂、転写と翻訳、呼吸作用と光合成、輸送と代謝を含みます。タンパク質複合体は部分的および一時的な変化を示すことがあり、安定性が異なるため、特定と分析が順調に進まないことがあります。BN-PAGEは、タンパク質複合体を高解像度で分離するための技術です。BN-PAGEは、タンパク質複合体のサイズ、相対的な豊富さ、およびサブユニット構成の分析を決定するために使用できます。

2D BN-PAGE分析では、タンパク質またはタンパク質複合体のサンプルが自然条件下で1D BN-PAGEで分離されます。クマシーブリリアントブルー染料は負電荷を持ち、すべてのタンパク質に非特異的に結合します。クマシーブリリアントブルーは界面活性剤として使用されないため、タンパク質複合体の構造が保持されます。また、クマシーブリリアントブルーの結合により、電気泳動中のタンパク質の凝集傾向が低下します。したがって、サンプルの電気泳動移動度は、結合したクマシーブリリアントブルーの負電荷および複合体のサイズと形状に依存します。BN-PAGEで分離した後、タンパク質およびタンパク質複合体のサンプルはゲル内でSDS変性され、その後2D SDS-PAGEゲル電気泳動分離が行われます。

BN-PAGEとSDS-PAGEの組み合わせにより、一次元の勾配ゲルと二次元の線形ゲルのため、単量体タンパク質は双曲線の対角線に沿って移動し、タンパク質複合体の構成成分はその対角線の下に位置します。同じタンパク質複合体サブユニットを表すタンパク質は、二次元の垂直線に見つけることができ、同じタンパク質が水平線上に複数のスポットを持つことは、そのタンパク質が同時にいくつかの異なるタンパク質複合体に存在することを示しています。
2D BN/SDS-PAGE分析は、サンプルのサイズ、数量、タンパク質組成、化学量論および相対的な豊富さに関する情報を提供でき、タンパク質複合体の研究に有用なツールです。