二次質量分析によるペプチドシーケンシング
ポリペプチド(Peptides)は、2つ以上のアミノ酸がペプチド結合で結合して形成される、生物学的機能を持つ生体高分子の一種です。二次質量分析(Tandem mass spectrometry、略称MS/MS)ポリペプチドシーケンシングは、連続質量分析技術を使用してタンパク質またはポリペプチドのアミノ酸組成と配列順序を特定する技術です。一次質量分析では、ポリペプチドフラグメントがイオン化され、質量電荷比に基づいて分析されます,一次質量スペクトルを生成——ポリペプチドフラグメントの質量電荷比と相対的な存在量。破砕後に生成されたポリペプチドフラグメントは再び質量電荷比分析を受け、二次質量スペクトルを生成——破片イオンの質量電荷比と相対的な存在量情報。よく使われる二次質量分析法には主にESI-MS/MS(エレクトロスプレーイオン化質量分析)、MALDI-MS/MS(マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析)、LC-MS/MS(液体クロマトグラフィー質量分析)。
百泰派克バイオテクノロジーBTP二次質量スペクトルポリペプチドシーケンシング一般的なプロセス
1.タンパク質抽出
2.酵素消化:特定のプロテアーゼを使用してタンパク質をポリペプチドフラグメントに切断
3.分離と精製:液体クロマトグラフィーを使用して酵素消化で生成されたポリペプチドを分離・精製
4.イオン化:ポリペプチドサンプルを気相イオンに変換
5.一次質量分析分析:気相イオンの質量を分析し、ポリペプチドの質量電荷比を得るm/z情報
6.イオンフラグメンテーション:特定のポリペプチドイオンを破砕し、破片イオンを生成
7.二次質量分析分析:破片イオンの質量を分析し、破片イオンの質量電荷比を得るm/z情報
8.データ処理と分析:二次質量スペクトルデータと既知のタンパク質データベースを比較してポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列を推定する
二次質量スペクトルポリペプチドシーケンシング技術の利点
1.高感度度
二次ポリペプチド質量スペクトルシーケンシングはピコモル(pmol)さらにはフェムトモル(fmol)レベルのポリペプチドを検出できる。
2.高精度と高分解能
二次質量分析技術はポリペプチドフラグメントの質量電荷比を正確に測定し,ポリペプチドフラグメントと質量の近いイオンを正確に識別し、ポリペプチド配列に関する正確な情報を提供。
3.高スループット
二次質量分析技術は短時間で大量のサンプルを分析できます。液体クロマトグラフィーなどの分離技術と組み合わせることで、二次質量分析は複雑な生物サンプル中の数千種類のタンパク質を迅速に特定できます。
4.高配列カバレッジ率
高い配列カバレッジは向上させることができますタンパク質とポリペプチド特定の正確さ。
中英語プロジェクトレポート
技術報告書では、百泰派克は詳細な日英バイリンガル版技術報告書を提供します。報告書には以下が含まれます:
1.実験手順(日英)
2.関連する質量分析パラメータ(日英)
3.二次質量スペクトルポリペプチド配列詳細情報
4.質量分析画像
5.生データ
二次質量スペクトルポリペプチドシーケンシングワンストップサービス
ご注文-サンプル送付のみ
百泰派克ワンストップサービス完了:サンプル処理-機器分析-データ分析-プロジェクト報告書
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