タンデム質量分析によるタンパク質同定
プロテインタンデム質量分析技術(Tandem Mass Spectrometry,MS/MS)は質量分析技術に基づく効率的で正確かつ敏感なタンパク質の定性的、定量的識別方法です。タンパク質プロテオミクス研究、生物薬品の品質管理、疾患のバイオマーカー発見などの分野で広く利用されています。。そのタンパク質の酵素分解生成物(ペプチド)の質量分析を通じて、目的タンパク質の同定を実現し、未知のタンパク質の同定も含まれます。この技術は1990年代初頭に生まれ、当初は液体クロマトグラフィーと質量分析の併用(LC-MS/MS)が主流でしたが、マトリックス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)などの技術の発展に伴い、タンパク質質量分析同定は新たな時代に入りました。現在ではタンデム質量分析技術は、プロテオミクス研究において重要な手段となっており、複雑な生体サンプル中のタンパク質の構造と機能を解析する上で重要な意義を持っています,生体内のタンパク質相互作用、シグナル伝達メカニズムの解明に役立ち、生物科学の発展や病気治療の進展を促進します。
バイタイパークバイオテクノロジーBTPタンパク質タンデム質量分析同定技術プロセス
1.サンプル準備:
実際の状況に応じて適切な方法(高性能液体クロマトグラフィーやゲル電気泳動など)を選択し、提供されたタンパク質サンプルを精製、濃縮、脱塩して不純物を除去し、タンパク質の純度を高めます。。
2.タンパク質の酵素分解:
精製されたタンパク質を多重酵素分解し、タンパク質をペプチド断片に切断し、その後の質量分析を容易にします。ペプチド分離:
3.ナノ高性能液体クロマトグラフィー(nano-HPLC)を用いてペプチドを分離し、分解能と検出感度を効果的に向上させます。
タンデム
4.質量分析質量分析:
高分解能・高感度の質量分析計を使用しています(Thermo FisherのQ ExactiveHF質量分析プラットフォーム、Orbitrap Fusion質量分析プラットフォーム、Orbitrap Fusion Lumos、Orbitrap Exploris 240)タンデム質量分析(MS/MS)により分離したペプチドの質量とフラグメントイオンを分析します。
5.データ分析:
プロのデータ処理ソフトウェアMascotとタンパク質データベースを用いてペプチドの質量一致とフラグメントイオン検索を行い、最終的にタンパク質を同定します、タンパク質名、アミノ酸配列、一致スコアなどの詳細情報が含まれています。
タンデム質量分析によるタンパク質同定技術の主な応用
1. ハイスループットタンパク質同定:
タンデム質量分析はプロテオミクス研究において重要な役割を果たし、生体サンプル中のタンパク質の同定と定量を行い、タンパク質の発現差異、相互作用、機能を明らかにします。
2. 翻訳後修飾研究:
タンパク質の翻訳後修飾(例えばリン酸化、アセチル化、糖鎖付加など)を同定し、これらの修飾がタンパク質の機能やシグナル伝達に与える影響を明らかにします。
3. タンパク質相互作用研究:
タンパク質複合体中の構成要素を同定し、タンパク質間の相互作用関係を明らかにすることで、生物学的シグナル伝達経路の研究に基礎を提供します。
4. タンパク質構造解析:
MS/MS技術はタンパク質の一次構造(アミノ酸配列)および部分的な二次、三次構造情報を解析し、タンパク質構造研究に参考データを提供します。
5. 疾病診断とバイオマーカー研究:
MS/MS技術は、病気に関連するタンパク質の同定と定量に使用され、病気の診断と予後評価の根拠を提供します。
サンプルについて
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サンプルの種類 |
細胞溶解物 |
組織抽出物 |
体液サンプル |
遺伝子発現産物 |
タンパク質複合体 |
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サンプルの数 |
50-200ug |
100-500ug |
10-100ug |
1-10ug |
5-50ug |
中/英語プロジェクトレポート
技術レポートでは、バイオテック社が詳細な中日二言語の技術レポートを提供します。レポートには以下が含まれます:
1. 実験手順(中日両言語)
2. 関連する質量分析パラメータ(中日両言語)
3. タンパク質のタンデム質量分析同定の詳細情報
4. 質量分析の画像
5. 生データ
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