プルダウン標的タンパク質質量分析

生物体の生命活動において、タンパク質の機能はタンパク質間の相互作用によって実現されます。したがって、新しいタンパク質相互作用の研究は、タンパク質の潜在的な機能を研究する新しい方向性を提供します。多くのタンパク質相互作用の同定実験の中で、プルダウン法は試験管内でのタンパク質相互作用の検証および新しい相互作用タンパク質の発見に役立ちます。プルダウン実験は、高度に精製され濃縮された餌タンパク質を利用して、細胞中で相互作用が弱いまたは存在量が低い標的タンパク質を捕捉し、新しい標的タンパク質の発見効率を大幅に向上させます。プルダウン実験の具体的なステップは、GST、polyHis、またはビオチン標識の餌タンパク質を発現および精製し、固定化されたアフィニティリガンドを使用して餌タンパク質を固相基質に安定して結合させ、餌タンパク質と試験細胞抽出液を混合してインキュベーションします。この過程で、餌タンパク質と目標タンパク質が相互作用して結合し、洗浄によって非特異的に結合した雑多なタンパク質を除去することで、餌タンパク質と相互作用する目標タンパク質を得ることができ、質量分析を通じて目標タンパク質を同定します。

百泰派克社は輸入したGSTプルダウンキットを利用して、タンパク質相互作用実験を迅速かつ正確に完了し、同社の先進的なUPLC-MS質量分析プラットフォームと組み合わせて、プルダウンに基づくタンパク質分析のワンストップ技術サービスを提供します。感度が高く、分解能が正確です。プルダウン実験後のタンパク質サンプルを検出するだけでなく、サンプルをお送りいただければ、プルダウン実験からサンプルの質量分析までワンストップで解決します。ご要望とサンプルをお送りいただければ、プロジェクトの後続すべての事柄を担当します。サンプルの前処理、プルダウン、質量分析、質量分析の元データ分析を含みます。

プルダウンタンパク質同定フロー

プルダウンタンパク質同定フロー

サンプルについて

1D SDS PAGE /2D PAGEゲルサンプル：
1. クマシーブルー、SYPRO Ruby、およびシルバーステインサンプルはすべてタンパク質の同定試験を行うことができます。
2. シルバーステインサンプルは後続の質量分析と互換性がない可能性があるため、以下の製品または実験手順を使用してシルバーステイン実験を行うことをお勧めします。
ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)
Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)
3. シルバーステインサンプルは脱色処理をしないでください。

液体サンプル（液状形式）：
1. 洗脱したサンプルをゲルに流す必要がある場合は、1D SDS PAGEサンプル準備要件に従ってサンプルを準備してください。
2. サンプル中のタンパク質量が10µgを超える場合、サンプルのバッファーシステムに要求はありません。
3. サンプル中のタンパク質量が10µg未満の場合、サンプル準備中にSDSなどの界面活性剤の使用をできるだけ減らし、塩濃度を下げることに注意してください。
4. サンプルの提出時には同時にサンプルのバッファーシステムとサンプル中のタンパク質の推定含量を提供してください。
サンプル輸送：
サンプルを凍結乾燥して輸送することをお勧めします。凍結乾燥サンプル中のタンパク質は非常に安定しています。
液体サンプルはドライアイスで輸送することをお勧めします。短距離輸送には保冷剤も使用できます。
注意：
質量分析を使用してタンパク質サンプルを同定する際、サンプル準備中に手袋とヘアキャップを着用し、ケラチンによるサンプルの汚染をできるだけ避けてください。

中/英語プロジェクトレポート

技術レポートでは、百泰派克は詳細な中英バイリンガル版技術レポートを提供し、レポートには以下が含まれます：

1. 実験手順（中英語）
2. 関連する質量分析パラメータ（中英語）
3. 質量分析画像
4. 元データ
5. 同定されたタンパク質の詳細情報