ヒストン翻訳後修飾分析

BTP-ヒストンの翻訳後修飾分析

ヒストンは高度に保存されたタンパク質の一種であり、異なるバリアント間の配列にはわずか数アミノ酸の差しかありません。ヒストンのN末端はメチル化、アセチル化、リン酸化、ユビキチン化、ADPリボシル化など様々な修飾を受けることができ、これらの共有結合修飾は遺伝子転写、DNA損傷修復、DNA複製、染色体凝縮などと密接に関連しています。ヒストン修飾は重要なエピジェネティックマーカーとして、他のエピジェネティックマーカーとの間にも一定の関係があり、複雑なネットワークを形成しています。ヒストンコードは従来のエピジェネティックコードの情報量を大いに豊かにしています。

ベタイパーク社はThermo FisherのQ ExactiveHF質量分析プラットフォーム、Orbitrap Fusion質量分析プラットフォーム、Orbitrap Fusion Lumos質量分析プラットフォームをNano-LCと組み合わせ、ヒストン修飾の定性および定量分析の完璧なソリューションを提供しています。実験の目的を教えていただき、サンプルをお送りいただければ、プロジェクトの後続のすべての事務を担当し、ヒストン修飾方法、修飾部位の識別および定量分析を提供します。

従来の定量的プロテオミクス分析と比較して、ヒストン修飾の定量分析の重要なステップは、純粋なヒストン成分をどのように分離精製するかです。ヒストンはすべて細胞核にあり、ベタイパーク社はNature Protocolに掲載された記事「Extraction, purification and analysis of histone」に基づき、独自の実験経験をもとにヒストンの分離精製実験プラットフォームを構築しました。細胞を解砕して低速遠心で細胞核を取り、再び細胞核を破砕し、ヒストンとDNAを分離し、高塩バッファーで不純物を沈殿させ、HPLCで分離精製して様々なヒストン成分を得て、その後の質量分析実験を行います。また、Nature Protocolの記事を基に、より多くのヒストン翻訳後修飾情報を識別および定量化するために、酵素切断過程で2～3種類の異なる酵素を使用してタンパク質サンプルを酵素切断し、質量分析におけるペプチドカバレッジを向上させ、ペプチドの長さが不適切、イオン化効率が低いために発生するヒストン翻訳後修飾情報の喪失を排除します。

ヒストン翻訳後修飾の識別研究ルート

BTP-ヒストン翻訳後修飾分析サンプル要件

1. 組織サンプルを提供する場合は、ドライアイスで組織サンプルをお送りください。植物組織サンプルは400mg以上、血液サンプルは少なくとも2ml（血漿はEDTAを使用して凝固を防ぐことに注意）、血清2ml、尿10ml、動物組織サンプルは少なくとも2g、細胞サンプルは1X10^8個の細胞、酵母、微生物などの乾燥重量400mgです。
2. タンパク質サンプルを提供する場合は、タンパク質の総量を2-5mgに保ってください。タンパク質の抽出時には通常の組織、細胞溶解液を使用できます。
3. サンプルの輸送：十分なドライアイスを使用して輸送し、できるだけ迅速な配送方法を選択して、輸送中のサンプルの劣化の可能性を低減してください。
4. 正式な実験の前に、提供されたサンプルを検査し、検査に合格次第、正式な試験を開始します。

BTP-ヒストン翻訳後修飾分析研究例

タンパク質ユビキチン化修飾部位の識別

中/英語プロジェクト報告書

技術報告書では、ベタイパークは詳細な中英二言語版技術報告書を提供し、報告書には以下が含まれます：

1. 実験手順（中英）
2. 関連する質量分析パラメーター（中英）
3. 識別されたヒストン翻訳後修飾の詳細情報
4. 質量分析画像
5. 生データ

BTP-ヒストン翻訳後修飾分析ワンストップサービス

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